استفاده از ویروس های نوترکیب مشتق از hiv-۱ برای ترانسداکشن سلول های ht۱۰۸۰ با هدف ژن درمانی بیماران بتا - تالاسمی

Authors

مریم بی خوف تربتی

maryam bikhof torbati instructor, phd of celluar & mollecular biology, department of biology, shahre rey branch, islamic azad university, tehran, iran. حسین خان احمد

hossein khanahmad assistant professor, phd of biologic products, pasteur institute of iran, karaj, iran فاطمه جمشیدی

fatemeh jamshidi msc of animal physiology, department of molecular medicine, pasteur institute of iran, tehran, iran مرتضی کریمی پور

morteza karimipor assistant professor, phd of biologic products, pasteur institute of iran, tehran, iran مجید صادقی زاده

abstract

سابقه و هدف: یکی از روش های درمانی موثر برای بیماری بتاتالاسمی، ژن درمانی توسط ویرال وکتورها می باشد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن بتاگلوبین و mini lcr جهت انتقال سازه ژنی مورد نظر به سلول های هدف به منظور ژن درمانی بتاتالاسمی ماژور می باشد. روش بررسی: در این مطالعه بنیادی - کاربردی، هر یک از قطعات ژن بتاگلوبین و mini lcr در یک لنتی وکتور به نام plenti-destکلون شدند. طی ترانسفکشن هم زمان وکتور نهایی به همراه سه وکتور کمکی با لیپوفکتامین 2000 به درون رده سلولی 293t، لنتی ویروسهای نوترکیب حاوی سازه ژنی مورد نظر تولید و با rt pcr تایید شدند.یافته ها: تیتر این لنتی ویروس های نوترکیب در رده سلولی ht1080 تعیین شد. ترانسداکشن سلول های هدف در حضور پلی برن 2 برابر شد. سلول های ht1080 ترانسدیوس شده پس از دو هفته انتخاب آنتی بیوتیکی باقی ماندند. dna این کلونی های باقی مانده استخراج و با روش pcr اینتگره شدن سازه ژنی ساخته شده تایید شد. moi اپتیمم این ویروس ها برای سلول ht1080 بدست آمد. نتیجه گیری: می توان از لنتی ویرال وکتورها سبب انتقال موثر، کارآمد و پایدار ژن به سلول های پستانداران مانند سلول های بنیادی با هدف ژن درمانی بسیاری از بیماری های ژنتیکی از جمله بتاتالاسمی و سرطان استفاده کرد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

استفاده از ویروس های نوترکیب مشتق از HIV-1 برای ترانسداکشن سلول های HT1080 با هدف ژن درمانی بیماران بتا - تالاسمی

سابقه و هدف: یکی از روش های درمانی موثر برای بیماری بتاتالاسمی، ژن درمانی توسط ویرال وکتورها می باشد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن بتاگلوبین و mini LCR جهت انتقال سازه ژنی مورد نظر به سلول های هدف به منظور ژن درمانی بتاتالاسمی ماژور می باشد. روش بررسی: در این مطالعه بنیادی - کاربردی، هر یک از قطعات ژن بتاگلوبین و mini LCR در یک لنتی وکتور به نام pLenti-Destکلون شدند. طی...

full text

بررسی ارتباط موتاسیون های ژن بتا - گلوبین در بیماران بتا - تالاسمی با پاسخ های درمانی متفاوت به داروی هیدروکسی اوره

Background and Purpose: β-thalassaemia is the most frequent inherited disorder in the world, especially in Iran and Mazandaran Province. It is caused by mulation in β-globin gene on chromosome 11 with more than 150 different mulations causing β-thalassaemia, has been identified in the β-globin gene to date. Hydroxyurea, is one of the drugs used in Thalassemia patient’s treatment, however, it ...

full text

بررسی جهش‌های ژن بتا گلوبین در بیماران تالاسمی با استفاده از روش PCR-SSCP

چکیده زمینه و هدف: بتا تالاسمی یکی از شایع ترین بیماری های ژنتیکی در ایران است و بیش از دو میلیون حامل بتا تالاسمی در ایران وجود دارد. شناسایی جهش‌های ژن بتاگلوبین برای برنامه‌های تشخیصی و مدیریتی معین مانند تشخیص پیش از زایمان بیماری بتاتالاسمی ضروری است. در کشور ما روش PCR-ARMS(PCR-amplification refractory mutation system) بطور گسترده برای شناسایی جهش‌های ژن بتا گلوبین استفاده می‌شود. روش...

full text

انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و minilcr به رده های سلولی cos-۷ و k۵۶۲ توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا -تالاسمی ماژور

هدف: بیماری بتا-تالاسمی در اثر غیاب یا کاهش سنتز زنجیره بتاگلوبین به وجود می آید. یکی از روش های درمانی مؤثر برای این بیماری ژن درمانی توسط ناقل های ویروسی است. ظرفیت ناقل های لنتی ویروسی حدود 8 کیلوباز است. با توجه به ظرفیت محدود ناقل های لنتی ویروسی از minilcr طراحی شده به طول 6 کیلوباز به جای ناحیه تنظیمی lcr در کنار ژن بتاگلوبین استفاده شد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی...

full text

طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1

Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...

full text

بررسی جهش های ژن بتا گلوبین در بیماران تالاسمی با استفاده از روش pcr-sscp

چکیده زمینه و هدف: بتا تالاسمی یکی از شایع ترین بیماری های ژنتیکی در ایران است و بیش از دو میلیون حامل بتا تالاسمی در ایران وجود دارد. شناسایی جهش های ژن بتاگلوبین برای برنامه های تشخیصی و مدیریتی معین مانند تشخیص پیش از زایمان بیماری بتاتالاسمی ضروری است. در کشور ما روش pcr-arms(pcr-amplification refractory mutation system) بطور گسترده برای شناسایی جهش های ژن بتا گلوبین استفاده می شود. روش برر...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران

جلد ۱۹، شماره ۳، صفحات ۱۶۰-۱۶۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023